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一种提取裸子植物组织中RNA的方法(发明专利)
来源:| 作者:| 浏览次数:| 发表时间:2016-04-21

一种提取裸子植物组织中RNA的方法(zl200910079897.0

发明人:张凌云

本发明公开了一种提取裸子植物组织中RNA的方法。该方法包括以下步骤:1)RNA提取缓冲液处理植物材料;2)去蛋白:用等体积的氯仿/异戊醇抽提两次;3)LiCl沉淀RNA和用SSTE回溶RNA4)去除多糖:将无水乙醇和醋酸钾加入到步骤3)得到的回溶溶液中,放入冰浴中沉淀多糖;5)再次经氯仿/异戊醇抽提;6)再次沉淀RNADEPC·H2O回溶RNA。为了去除DNA,还可进行以下步骤:a)用无RNase污染的DNase去除DNAb)用氯仿/异戊醇抽提去除DNasec)重复步骤6)。其中,所述RNA提取缓冲液中含有100mmol/LTrisHCl(pH8.0)2g/100mlCTAB2g/100mlPVP2mol/LNaCl25mmol/LEDTA,使用前加入终浓度10mmol/L二硫苏糖醇和2(体积百分比)的β-巯基乙醇。这样解决了多糖、多酚等干扰,得到的RNA纯度高。

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