一种提取裸子植物组织中RNA的方法(zl200910079897.0)
发明人:张凌云
本发明公开了一种提取裸子植物组织中RNA的方法。该方法包括以下步骤:1)用RNA提取缓冲液处理植物材料;2)去蛋白:用等体积的氯仿/异戊醇抽提两次;3)用LiCl沉淀RNA和用SSTE回溶RNA;4)去除多糖:将无水乙醇和醋酸钾加入到步骤3)得到的回溶溶液中,放入冰浴中沉淀多糖;5)再次经氯仿/异戊醇抽提;6)再次沉淀RNA和DEPC·H2O回溶RNA。为了去除DNA,还可进行以下步骤:a)用无RNase污染的DNase去除DNA;b)用氯仿/异戊醇抽提去除DNase;c)重复步骤6)。其中,所述RNA提取缓冲液中含有100mmol/L?Tris?HCl(pH?8.0)、2g/100mlCTAB、2g/100mlPVP、2mol/LNaCl、25mmol/L?EDTA,使用前加入终浓度10mmol/L二硫苏糖醇和2%(体积百分比)的β-巯基乙醇。这样解决了多糖、多酚等干扰,得到的RNA纯度高。
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